TTF-1启动子调控miR-7表达对人肺癌95D细胞体外凋亡的影响

• 作者: 卢佳 崔盼盼 廖珍媛 徐华林 徐林 田丹 郑静 陈超 雷良玉
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: miR-7 甲状腺转录因子-1(TTF-1) 启动子 基因治疗 肺癌
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 176-181
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201702005

摘要

目的 观察甲状腺转录因子-1(TTF-1)启动子调控miR-7表达对人肺癌细胞体外凋亡的影响,并探讨其意义.方法 将前期构建的TTF-1启动子调控miR-7真核表达载体(命名为p-T-miR-7)与对照载体p-cont分别体外瞬时转染人肺癌95D细胞,采用FCM法检测95D细胞凋亡比例;TUNEL法检测95D细胞凋亡情况;Western blot检测各组中磷酸化Caspase3和磷酸化Caspase9的蛋白的表达;共聚焦显微技术检测miR-7靶分子CGGBP1和EGFR蛋白的表达;最后,采用Western blot检测各组中磷酸化Akt和Erk蛋白的表达.结果 体外转染48 h后,与p-cont转染组相比,转染p-T-miR-7组细胞凋亡比例明显增加(P<0.05);磷酸化Caspase3和磷酸化Caspase9蛋白水平均显著增加(P<0.05),同时EGFR和CGGBP1蛋白表达均明显降低,且细胞中磷酸化Akt和Erk蛋白水平亦显著降低(P<0.05).结论 TTF-1启动子调控miR-7表达可导致人肺癌细胞的凋亡.这为后续基于miR-7的人肺癌基因靶向治疗策略的开发提供了前期实验依据.