RNA干扰技术探讨参芪扶正注射液对MHCC97L细胞侵袭力的影响

• 作者: 丁治国 何蓓 户蕊 李乃卿 李会龙 李璐 汪唐顺 王鑫 陈晓珩
• 来源期刊: 中国现代普通外科进展
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 参芪扶正注射液 VEGF 侵袭力
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 505-510
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3860字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-99905.2017.07.001

摘要

目的:通过检测参芪扶正注射液对肝癌MHCC97L细胞侵袭力及其VEGF基因表达的影响,明确其降低肝癌瘤株侵袭力的作用,并通过RNA干扰技术加以验证.方法:在MHCC97L体外培养系中加入参芪扶正注射液(0.5 g/L)作用24 h后,Transwell检测参芪扶正注射液对MHCC97L细胞侵袭性的影响;同时使用Real-time PCR和Western-blot分别检测药物组、阴性对照组和空白对照组中VEGF基因的转录与表达情况,确定参芪扶正注射液对VEGF基因转录与表达的影响;构建VEGF干扰慢病毒载体并实现其在人肝癌细胞MHCC97L中表达,并通过RT-PCR、Western-Blot进行验证,确定其干扰VEGF基因表达的有效性;Transwell检测参芪扶正注射液对VEGF“沉默”瘤株侵袭力的影响并与正常瘤株进行比较.结果:参芪扶正注射液能够降低MHCC97L细胞中VEGF基因的转录与表达(P＜0.05),并能够降低中瘤侵袭力(P＜O.05);VEGF基因“沉默”瘤株构建成功,VEGF基因“沉默”后,参芪扶正注射液对MHCC97L瘤株侵袭力的影响不显著(P＞0.05).结论:参芪扶正注射液可以通过抑制MHCC97L细胞VEGF基因的表达以降低其侵袭力.