鲤疱疹病毒II型ORF4基因的克隆、表达与免疫学检测方法

• 作者: 刘文枝 周勇 徐进 曾令兵 江南 范玉顶 马杰
• 来源期刊: 淡水渔业
• 学科: 农学
• 关键词: 鲤疱疹病毒II型 ORF 4 原核表达 多克隆抗体 免疫荧光检测
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 61-65
• 页数: 5页
• 分类号: S941.41
• 字数: 4330字
• 语种: 中文

摘要

根据鲤疱疹病毒II型(Cyprinid herpesvirus II,CyHV-2)ORF 4基因序列(GenBank：JQ815364．1)设计特异性引物,PCR扩增得到ORF 4基因编码框全长序列1041 bp,将其克隆至原核表达载体pET-32a (+)中,构建了重组原核表达载体pET-32a-ORF 4。将pET-32a-ORF 4重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到融合表达的重组蛋白,融合表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,其分子质量约为57 ku,与预期大小一致。将纯化的重组蛋白免疫日本大耳兔,制备了多克隆抗体, ELISA检测抗体效价大于1∶50000, Western blot检测显示该抗体可以特异性识别重组蛋白。间接免疫荧光检测结果表明：该多克隆抗体可与由CyHV-2感染引起细胞病变的异育银鲫脑组织细胞( GICB)发生特异性的结合。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐进	中国水产科学研究院长江水产研究所	36	359	11.0	17.0
2	范玉顶	中国水产科学研究院长江水产研究所	30	231	10.0	14.0
3	曾令兵	中国水产科学研究院长江水产研究所	56	582	14.0	22.0
4	周勇	中国水产科学研究院长江水产研究所	36	264	9.0	15.0
5	刘文枝	中国水产科学研究院长江水产研究所	15	35	3.0	5.0
6	江南	中国水产科学研究院长江水产研究所	12	64	4.0	8.0
7	马杰	中国水产科学研究院长江水产研究所	11	82	5.0	9.0