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摘要:
小核糖核酸(micro ribonucleic acid,miRNA)是一类长度为20~24核苷酸(nucleotide,nt)的非编码的核糖核酸(ribonucleic acid,RNA),在植物生长发育过程中具有重要作用.为鉴定参与植物miRNA合成、降解和运输等通路的因子,利用拟南芥转基因株系SUC2:amiR-SUL进行正向遗传筛选体系,通过对该株系进行甲基磺酸乙酯(ethylmethylsulfone,EMS)诱变筛选获得SUP-E45突变体.对该突变体进行表型观察、实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和全基因组测序实验.结果显示,突变的基因为Agol(Argonaute1),该基因编码的AGO1蛋白是miRNA通路中至关重要的蛋白,成熟的miRNA与AGO1蛋白结合形成miRISC沉默复合体(miRNA-induced silencingcomplex,miRISC)从而对靶基因的表达进行负调控.验证了该筛选体系的可行性.通过该筛选体系可筛选出其他参与miRNA合成、影响miRNA活性或miRNA运输等通路的因子,为后续拟南芥miRNA通路的研究奠定了基础.
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文献信息
篇名 拟南芥microRNA通路中新因子的筛选和突变体分析
来源期刊 深圳大学学报(理工版) 学科 生物学
关键词 分子生物学 转基因株系SUC2:amiR-SUL 拟南芥 正向遗传筛选 小核糖核酸 AGO1蛋白 EMS诱变 实时荧光定量聚合酶链式反应 全基因组测序
年,卷(期) 2017,(5) 所属期刊栏目 生物工程
研究方向 页码范围 464-470
页数 7页 分类号 Q946.2
字数 3976字 语种 中文
DOI 10.3724/SP.J.1249.2017.05464
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 莫蓓莘 深圳大学生命与海洋科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室 21 50 4.0 6.0
2 梁超 深圳大学生命与海洋科学学院广东省表观遗传重点实验室 3 22 2.0 3.0
3 赵庆喆 深圳大学生命与海洋科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室 1 1 1.0 1.0
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分子生物学
转基因株系SUC2:amiR-SUL
拟南芥
正向遗传筛选
小核糖核酸
AGO1蛋白
EMS诱变
实时荧光定量聚合酶链式反应
全基因组测序
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