杧果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B克隆与敲除载体构建

• 作者: 刘娅楠 刘晓妹 周芳雪 张恺莉 张贺 杨永利 蒲金基
• 来源期刊: 中国南方果树
• 关键词: 杧果 胶孢炭疽菌 内切葡聚糖酶CgEg1B基因 克隆 敲除载体
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 5-10
• 语种: 中文
• DOI: 10.13938/j.issn.1007-1431.20160166

摘要

为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与杧果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides致病力的关系,本试验以杧果炭疽病菌DNA为模板,利用同源克隆技术扩增CgEg1B,对其序列特征、蛋白保守结构域进行分析,并借助In-Fusion HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建.结果表明,该基因DNA和cDNA全长分别为1 077 bp、1 020 bp,编码区有内含子(57 bp)1个,推测编码339个氨基酸,其分子量约为37.13 kDa,等电点PI为5.11.与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对,发现该序列与鳄梨炭疽菌C.gloeos porioides(EQB54542.1)的内切葡聚糖酶基因相似性为99％;该基因的敲除载体pCgEg1BGH-1构建成功.CgEg1B基因具备真菌内切葡聚糖酶基因家族的序列特征,推测CgEg1B基因可能与杧果炭疽病菌的侵入、定殖和致病性有关.