小鼠PD-1胞外段重组蛋白表达及其包涵体复性

• 作者: 刘鑫 康巧珍 张成龙 江慧 黄夏冰
• 来源期刊: 郑州大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: PD-1 原核表达载体 包涵体 复性
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 页码范围: 111-115
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3996字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6841.2016204

摘要

旨在利用原核表达系统制备可溶性的PD-1胞外段(以下简称exPD-1)蛋白.以C57BL/6小鼠脾细胞cDNA为模板,扩增小鼠exPD-1基因,成功构建重组质粒pET-28a-exPD-1,并在E.coli BL21(DE3)中诱导表达.结果显示,小鼠exPD-1重组蛋白大小约为17 kD,以包涵体形式存在.exPD-1包涵体蛋白经8 mol/L尿素变性、Ni-NTA亲和层析后,采用尿素梯度透析法对蛋白进行复性,复性效果不佳,添加氧化/还原型谷胱甘肽复性后,复性率达到50%以上,提高了复性效率.小鼠exPD-1蛋白的成功制备,为进一步研究PD-1的免疫学功能奠定了材料基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康巧珍	郑州大学生命科学学院	32	117	7.0	9.0
2	刘鑫	郑州大学生命科学学院	39	61	5.0	6.0
3	张成龙	郑州大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
4	黄夏冰	郑州大学生命科学学院	4	17	3.0	4.0
5	江慧	郑州大学生命科学学院	2	5	2.0	2.0