抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 代飞 刘宝京 左玉柱 申小强 罗尚星 范京惠 邸晶美 顾文源
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 单克隆抗体 S蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 页码范围: 96-100
• 页数: 5页
• 分类号: S852.4+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2017.0087

摘要

为了制备抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的单克隆抗体(MAb),本试验将Vero细胞中增殖的PEDV超速离心纯化,作为免疫原免疫BALB/c雌性小鼠,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术和PEDV重组S蛋白为基础的间接ELISA方法,制备并筛选能稳定分泌PEDV特异性抗体的杂交瘤细胞;分别采用间接ELISA、Westernblot和间接免疫荧光(IFA)试验,对单克隆抗体的亚型、特异性等生物学特性进行鉴定.结果表明,本试验成功获得了1株稳定分泌PEDV特异性抗体的杂交瘤细胞株5C3.MAb亚类鉴定为IgM,轻链为k型.杂交瘤细胞连续传至20代,细胞培养上清液和小鼠腹水抗体效价分别稳定在1∶600和1∶10 000.特异性试验结果显示,MAb不与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪伪狂犬病毒(PrV)、猪圆环病毒(PCV2)发生交叉反应.west-ern-blot结果显示,MAb能特异性识别PEDV的重组S蛋白.IFA试验结果表明,MAb能与PEDV感染的vero细胞产生特异性荧光.说明本试验获得的MAb能特异性识别重组及天然的PEDV S蛋白,具有良好的抗原性和特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范京惠		56	237	9.0	13.0
2	左玉柱	河北农业大学动物医学院	86	419	10.0	17.0
3	申小强	河北农业大学动物医学院	4	11	2.0	3.0
4	顾文源	河北农业大学动物医学院	6	18	2.0	4.0
6	邸晶美	河北农业大学动物医学院	9	24	3.0	4.0
9	罗尚星	河北农业大学动物医学院	10	27	3.0	4.0
10	刘宝京	河北农业大学动物医学院	13	29	3.0	4.0
11	代飞	河北农业大学动物医学院	4	7	2.0	2.0