Escherichia coli str.K-12 substr.MG1655海藻糖酶Tre F的重组表达及性质研究

• 作者: 于林港 吴敬 宿玲恰
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 海藻糖酶 基因克隆 重组表达 酶学特性
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 177-184
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.04.023

摘要

海藻糖酶(Trehalase)是一种海藻糖水解酶,能够特异性的将海藻糖分解为两分子的葡萄糖.为了将Escherichia coli str.K-12 substr.MG1655的海藻糖酶基因Tre F在E.coli BL21(DE3)中重组表达和应用,该研究通过PCR扩增获得E.coli str.K-12 substr.MG1655的海藻糖酶基因Tre F,构建了基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET-24a(+)-Tre F.对重组菌进行摇瓶发酵,25℃,IPTG浓度为0.4 mmol/L时,摇瓶发酵诱导24 h时得到最高酶活为107 U/mL.进一步研究了海藻糖酶的酶学性质,发现该海藻糖酶的最适pH为7.0,最适温度为50℃;此外,将该酶应用于海藻糖的水解,起始海藻糖浓度为300 g/L,初始pH 7.0、反应温度30℃,加酶量为84 U/g,反应36 h,葡萄糖转化率可达98.4%.该研究是首次将E.coli str.K-12 substr.MG1655海藻糖酶基因Tre F在E.coli BL21(DE3)宿主中重组表达的报道.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴敬	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	68	328	7.0	16.0
5	宿玲恰	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	25	37	4.0	4.0
6	于林港	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0