miR-142-5p靶向调控TGF-β2促进人巨噬细胞凋亡

• 作者: 刘慧 张明磊 李玉东 李聪聪 杨清泉 王星
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 动脉粥样硬化 靶基因 miR-142-5p 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 475-479
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2017.05.008

摘要

目的 探讨miR-142-5p在动脉粥样硬化组织中的表达及对人巨噬细胞凋亡的作用.方法 构建动脉粥样硬化大鼠模型,qRT-PCR检测动脉粥样硬化组织中miR-142-5p的表达水平.50 μg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激人巨噬细胞、血管平滑肌细胞(VSMC)、内皮细胞24h后,提取细胞RNA,qRT-PCR检测细胞中miR-142-5p的表达水平.靶基因预测软件预测miR-142-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因鉴定靶基因的正确性.细胞转染miR-142-5pmimic、mimic control、miR-142-5p inhibitor、inhibitor control,Western blot和qRT-PCR检测miR-142-5p对靶基因的调控作用,流式细胞仪检测miR-142-5p和靶基因对巨噬细胞凋亡的作用.结果 miR-142-5p在动脉粥样硬化组织中表达上调,与正常组织相比差异显著(P＜0.01).血管平滑肌细胞和内皮细胞经ox-LDL刺激后miR-142-5p的表达水平与刺激前没有明显变化,而巨噬细胞经ox-LDL刺激后miR-142-5p的表达水平较刺激前明显升高(P＜0.01).预测miR-142-5p的靶基因为转化生长因子β2(TGF-β2).miR-142-5p mimic与TGF-β2共转染后荧光素酶活性最低;miR-142-5p mimic组TGF-β2蛋白和mRNA的表达水平与mimic control组相比明显下降,miR-142-5p inhibitor组TGF-β2蛋白和mRNA的表达水平与inhibitor control组相比明显升高(P＜0.01);miR-142-5pmimic组细胞凋亡率明显高于mimic control组,TGF-β2 siRNA组细胞凋亡率明显高于siRNA control组(P＜0.01).结论 miR-142-5p在动脉粥样硬化中过度表达,miR-142-5p通过下调靶基因TGF-β2促进人巨噬细胞凋亡.