HIV P55-gag蛋白促进骨髓间充质干细胞的老化

• 作者: 曾毅 李东升 王小莉 腾智平 袁雅红 赵珊珊
• 来源期刊: 生物医学工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: HIV P55-gag蛋白 骨髓间充质干细胞 老化 成骨分化 骨代谢
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 52-56,61
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 4155字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19529/j.cnki.1672-6278.2017.01.11

摘要

探索HIV P55-gag蛋白对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell, BMSC)老化的影响,进一步阐明HIV P55-gag蛋白抑制BMSC成骨分化的机理.原代分离、培养、纯化BMSC,再将其分两组进行处理,一组为常规培养对照组(BMSCcon),另一组为添加HIV P55-gag蛋白培养组(BMSCgag);通过计算培养5、10、15及20天的BMSCcon和BMSCgag的群体倍增水平,比较增殖能力;将培养20天的BMSCcon和BMSCgag分别标记Brdu, 免疫荧光法检测Brdu 掺入率,比较两组细胞的增殖水平;通过检测细胞衰老生物标记β-半乳糖苷酶,比较两组细胞的衰老程度;Western检测两组细胞衰老相关蛋白P21的表达强度;将两组细胞诱导成骨分化,比较其成骨分化能力.在培养15天和20天时,BMSCgag群体倍增水平明显低于BMSCcon;BMSCgag的 Brdu 掺入率明显低于BMSCcon,分别为(26±4.1)% 和(45±3.7)%;β-半乳糖苷酶染色检测显示,BMSCgag的衰老细胞数明显多于BMSCcon,分别为(21±4.7)%和(8±2.1)%;BMSCgag的P21的表达强度明显强于BMSCcon;成骨诱导后,茜素红染色和ALP染色均显示,BMSCgag的成骨分化能力明显弱于BMSCcon. HIV P55-gag蛋白促进BMSC老化,进而抑制其成骨分化能力.