长毛兔毛乳头细胞的分离培养及生长特性研究

• 作者: 呼红梅 姜文学 孙海涛 杨丽萍 白莉雅 高淑霞
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 长毛兔 毛乳头细胞 分离培养 细胞增殖 生长特性
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 20-26
• 页数: 7页
• 分类号: S811.5
• 字数: 5414字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1182.2017.10.004

摘要

为了成功分离培养家兔毛乳头细胞(DPCs),为体外开展家兔毛囊发育的相关机制研究提供良好模型,本研究采用中性蛋白酶与胶原酶两步消化法,分离并纯化长毛兔DPCs,观察体外生长的DPCs细胞形态并绘制生长曲线.结果表明,长毛兔DPCs在第4～7天进入对数生长期;体外培养的DPCs α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(VIM)表达均呈阳性,证实分离培养的细胞确为毛囊真皮源性的毛乳头细胞.ECCK-8比较第3代和第9代DPCs的增殖特性,显示在120 h和144 h生长高峰时,第9代的细胞密度显著低于第3代的细胞密度(P＜0.05);细胞周期结果显示,在72 h、96 h、122 h和144 h时,第3代DPCs的G0/G1期比例显著低于第9代(P＜0.05),而G2/M期的细胞比例显著高于第9代(P＜0.05),表明传至9代以后DPCs不再适合体外培养.本研究成功建立了长毛兔毛乳头细胞体外培养条件,为体外研究家兔毛囊发育机制奠定良好的理论基础.