诺卡氏菌mce1A基因的克隆及重组表达

• 作者: 冯娟 徐力文 苏友禄 蒋魁 许海东 郭志勋 高芳
• 来源期刊: 南方水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 诺卡氏菌 mce1A基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 页码范围: 94-103
• 页数: 10页
• 分类号: S941.24+9
• 字数: 9191字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.01.012

摘要

诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是近年来海淡水养殖鱼类频发慢性传染病的病原菌.该研究通过引物扩增得到全长1 254 bp、编码417个氨基酸的诺卡氏菌毒力因子mce1A基因的全序列.该基因编码蛋白质的分子量约为43.98 kD,理论等电点5.14,含有161个疏水性氨基酸,疏水性平均值为0.044,为疏水性蛋白,具有α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲3种结构.经预测,Mce1A有MCE、DUF3407区域、OM_asym_MlaD、Mtu_fam_mce、MlaD 5个结构域,彼此交叠,含有公共区域.根据Mce1A氨基酸构建的系统进化树可以发现诺卡氏菌和新星诺卡氏菌的亲缘关系最近.构建pET32a-mce1A重组质粒并转化至大肠埃希菌BL21中,得到的重组蛋白的相对分子量约63 kD.温度、IPTG浓度对重组蛋白表达量没有影响.该研究为进一步研究Mce1A的致病机制奠定了基础.