一种人抗PD-L1单抗的间接ELISA方法的建立

• 作者: 史晶莹 吴丛梅 孙博 李雪 殷玉和 董雪 郭晶
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗程序性死亡配体-1抗体 酶联免疫吸附分析 检测 灵敏度
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 552-556
• 页数: 5页
• 分类号: Q331
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.06.0082

摘要

[目的]制备一种人抗PD-L1抗体,建立其酶联免疫吸附分析(ELISA)的检测方法.[方法]将表达抗体重链和轻链的质粒转染到HEK-293细胞制备抗体,并建立ELISA方法对抗体进行检测.[结果]间接ELISA法的最佳抗原包被浓度为0.25 μg/mL,抗PD-L1抗体标准品的起始浓度为0.25 μg/mL,最适封闭液浓度为2％ BSA,最适封闭时间为2h,二抗的最佳稀释度为1∶4 000.细胞上清中的抗PD-L1抗体样品1的滴度为125,浓度66.66 ng/mL,灵敏度为6.3ng/mL;样品2的滴度为125,浓度为81.8 ng/mL,灵敏度为5.9 ng/mL.[结论]建立了一种人抗PD-L1单克隆抗体的间接ELISA检测方法,经对样品1和样品2的批内批间重复性试验统计分析,变异系数均＜10％,该ELISA法适用于该抗体的检测.