烟草花叶病毒辽宁分离物Northern杂交检测体系的建立

• 作者: 吴元华 安梦楠 李艳丽 王冠中
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 烟草花叶病毒辽宁分离物 RNA探针 DNA探针 点印迹杂交 Northern杂交
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 137-142
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.04.017

摘要

为了建立烟草花叶病毒辽宁分离物(TMV-LN)的高特异性、高灵敏度的分子杂交检测体系,从粗提纯的TMV-LN粒子中提取RNA,设计特异性引物通过RT-PCR扩增TMV-LN的CP和3'端非翻译区域,将片段连至pUC119载体获得重组质粒pUCTMV-PP,体外转录获得地高辛(DIG)标记的TMV-LN正义链RNA杂交检测探针,同时构建DNA检测探针作为对照.采用点印迹(Dot-blot)杂交和Northern杂交对比RNA探针和DNA探针对TMV-LN的检测特异性和灵敏性.检测结果表明,RNA探针和DNA探针在点印记杂交和Northern杂交中均表现出良好的检测特异性,RNA探针在检测灵敏度方面要略好于DNA探针,且点印迹杂交体系在病毒定性方面较为快捷,Northern杂交体系在病毒基因组RNA的定量方面具有明显优势.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴元华	沈阳农业大学植物保护学院	159	2074	24.0	38.0
2	安梦楠	沈阳农业大学植物保护学院	17	34	3.0	5.0
3	李艳丽	沈阳农业大学植物保护学院	6	248	3.0	6.0
4	王冠中	沈阳农业大学植物保护学院	2	14	2.0	2.0