五味子甲素对NLRP3炎性小体活性的抑制作用及机制初步研究

• 作者: 何娟娟 崔鹤蓉 李朋彦 李雨萌 桑秀秀 牛明 王伽伯 王睿林 蔡光明
• 来源期刊: 药学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 五味子甲素 NLRP3炎性小体 炎症反应 caspase-1
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 药理学
• 页码范围: 80-85
• 页数: 6页
• 分类号: R963
• 语种: 中文
• DOI: 10.16438/j.0513-4870.2016-0784

摘要

探讨五味子甲素(deoxyschizandrin,schisandrin A)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)中NLRP3 (NOD-like receptor family,pyrin domain containing 3)炎性小体活性的抑制作用及初步机制.CCK-8法检测细胞毒性,根据细胞存活率确定给药浓度.通过Western blot方法检测细胞培养上清中IL-1β和caspase-1的表达,分析不同浓度的五味子甲素(25、50、100和200 μmol·L-1)对尼日利亚菌素(nigericin,Nig)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导的NLRP3炎性小体活化的影响,检测细胞中pro-caspase-1、pro-IL-1β、ASC和NLRP3等蛋白的表达变化;免疫荧光技术分析NF-κB (p65)的入核情况.根据CCK-8法的结果,确定了五味子甲素的给药浓度范围为6.25～400 μmol·L-1.在25～200 μmol·L-1浓度内,五味子甲素能够抑制Nig和ATP引起的NLRP3炎症小体活化,进而抑制IL-1β的分泌.免疫荧光和Westem blot实验结果显示,五味子甲素对NLRP3炎症小体活性的抑制作用不依赖于NF-κB通路活性及其诱导的NLRP3、ASC和pro-IL-1β等炎性小体蛋白的表达.综上,本实验首次证实,五味子甲素在一定浓度范围内通过阻断caspase-1活化,抑制caspase-1对pro-IL-1β的剪切活化,进而抑制NLRP3炎性小体的活性,减轻免疫炎症反应.本研究为五味子甲素防治NLRP3炎性小体相关的疾病提供了参考依据.