棉铃虫乙醇脱氢酶原核可溶性表达条件的优化

• 作者: 刘小宁 王亚美 艾新宇 赵洁 魏原杰
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 棉铃虫 原核表达 乙醇脱氢酶 条件优化
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 开发与应用
• 页码范围: 65-70
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.01.0011

摘要

[目的]提高棉铃虫乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)在大肠杆菌中可溶性蛋白的表达量.[方法]研究了诱导温度和诱导剂IPTG浓度对可溶性His-ADH融合蛋白表达量的影响.设置15℃、20℃、25℃、30℃、37℃五个不同温度和0.2 mmol/L、0.4 mmol/L、0.6 mmol/L、0.8 mmol/L、1.0 mmol/L五个不同的IPTG诱导剂浓度分别进行原核诱导表达.基于SDS-PAGE和灰度扫描来评价可溶性融合蛋白的表达水平.[结果]表达的目的融合蛋白相对分子质量约为53 kDa,与预测的分子量大小一致,Western Blot分析表明能与His单克隆抗体特异性结合;可溶性融合蛋白的最佳诱导条件为温度25℃、IPTG浓度0.6 mmol/L.[结论]表达优化最终条件为温度25℃(相对表达量为2.21)、IPTG浓度0.6 mmol/L(相对表达量为1.14).低温有利于可溶性蛋白的形成,诱导剂1PTG浓度并不是越高越好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小宁		45	144	6.0	10.0
2	赵洁		12	15	2.0	3.0
3	王亚美		7	6	2.0	2.0
4	艾新宇		6	3	1.0	1.0
5	魏原杰		6	3	1.0	1.0