丙泊酚对肾小管上皮细胞系缺血再灌注损伤后纤维化和TAK1的影响

• 作者: 伍辉萍 刘梅芳 周俊 李云 杨承祥 梁幸甜 欧伟明
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: 丙泊酚 缺血再灌注损伤 TAK1 肾间质纤维化
• 年，卷（期）: 2017,（20）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3077-3081
• 页数: 5页
• 字数: 3480字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2017.20.004

摘要

目的 探讨丙泊酚对人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)缺血再灌注损伤后纤维化的作用及转化生长因子β激活激酶(TAK1)在其中的可能作用机制.方法 采用随机数字表法将HK-2细胞分为6组(n=36):空白对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、丙泊酚组(IRP组)、脂肪乳剂组(IRF组)、TAK1过表达组(IRPT组)、TAK1过表达阴性病毒对照组(IRPTI组).采用抗霉素A耗竭HK-2细胞ATP后更换正常培养液恢复补充代谢底物的方法制备ATP耗竭再恢复损伤模型模拟体内细胞缺血再灌注损伤状态.C组正常培养,不作任何处理;IR组:正常培养的HK-2细胞更换为含10 μmol/L抗霉素A及1μmol/L钙离子通道载体A23187的无血清DMEM培养基孵育1h,PBS清洗之后再换成正常含血清培养基继续培养12、24、48 h;IRP组于ATP耗竭前1h,正常培养基中加入丙泊酚(终浓度20 μmol/L)预孵育1h;IRPT组于正常培养基中加入丙泊酚(终浓度20 μmol/L)及TAK1慢病毒(滴度为2×107TU/mL)预孵育1 h;IRF组正常培养基中加入10％脂肪乳剂预孵育1 h;IRPTI组正常培养基中加入丙泊酚(终浓度20 μmol/L)及TAK1阴性慢病毒预孵育1h,其余处理均同IR组.于ATP再恢复12 h时,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT法测定细胞活力;于ATP再恢复12、24和48 h时,采用Western blot法测定TAK1的表达水平,于ATP再恢复48 h时Western blot法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维粘连蛋白(FN)、胶原蛋白1(COL 1)的表达水平.结果 与C组比较,IR组细胞凋亡率增加,细胞活力降低,ATP再恢复后TAK1、COL1、α-SMA和FN表达均上调(P＜0.05);与IR组比较,IRP组细胞凋亡率减少,细胞活力增强,ATP再恢复后TAK1、COL1、α-SMA和FN表达均下调(P＜0.05);与IRP组比较,IRPT组细胞凋亡率增加,细胞活力降低,再恢复后TAK1、COL1、α-SMA和FN表达均上调(P＜0.05).结论 丙泊酚预处理可减轻ATP耗竭再恢复诱导的HK-2细胞纤维化,其机制可能是通过下调TAK1表达,进而抑制了早期细胞凋亡,从而减轻了HK-2细胞纤维化程度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	欧伟明	佛山市第一人民医院麻醉科	7	52	4.0	7.0
2	杨承祥	佛山市第一人民医院麻醉科	111	641	13.0	19.0
3	周俊	佛山市第一人民医院麻醉科	31	133	5.0	10.0
4	李云	佛山市第一人民医院麻醉科	8	17	2.0	3.0
5	梁幸甜	佛山市第一人民医院麻醉科	7	24	4.0	4.0
6	刘梅芳	佛山市第一人民医院麻醉科	11	23	3.0	4.0
7	伍辉萍	佛山市第一人民医院麻醉科	8	17	3.0	3.0