qRT-PCR快速检测汉滩病毒抗体中和活性实验方法的建立

• 作者: 冯伟 刘梓谕 刘蓉蓉 叶伟 吴兴安 应旗康 张亮 张尧 张晓晓 张芳琳 徐志凯 王芳 程林峰 马瑞雪 马铁军
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 汉滩病毒 qRT-PCR 中和抗体 微量中和实验 肾综合征出血热
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 524-527
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 3197字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2017.04.024

摘要

目的:建立一种基于qRT-PCR的微量细胞中和实验改良法,快速、定量检测汉滩病毒感染中的中和抗体活性.方法:将本室前期制备的抗汉滩病毒高中和活性鼠源性单抗3G1、鼠/人嵌合单抗1D9和感染剂量为100 TCID50的病毒混合液于37℃孵育1h后感染Vero-E6细胞,提取细胞总RNA.根据GenBank数据库中汉滩病毒76-118株S基因序列设计特异性引物,在上述实验基础上以细胞总RNA为检测样品,建立qRT-PCR快速、定量检测汉滩病毒感染中中和抗体活性的实验方法.结果和结论:建立了一种基于qRT-PCR的微量细胞中和实验改良法,可定量测定汉滩病毒感染中的中和抗体活性,该法具有快速、灵敏、特异和重复性好等优点.