蛋白质INSM1中的锌指结构域ZF(4-5)的表达、纯化与表征

• 作者: 刘买利 岳霞丽 朱勤俊 杨运煌 王华谱
• 来源期刊: 波谱学杂志
• 学科: 物理学
• 关键词: 液体核磁共振(solutionNMR) 锌指蛋白 表达与纯化 结构与功能
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: O482.53
• 字数: 3277字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11938/cjmr20170101

摘要

胰岛素瘤相关蛋白1(INSM1)是一类转录调节蛋白,通过其C-端的锌指结构域(氨基酸250-510)来识别序列特异性的DNA分子.INSM1的C-端包含有5个串联的锌指结构域,然而这些结构域的结构及其如何识别DNA的分子机制目前仍不清楚.通过重组构建的质粒pET-32m-INSM1(424-497)表达的蛋白质(氨基酸424-497)包含了最后两个锌指结构域4和5,简称为ZF(4-5).该文详细研究了蛋白质ZF(4-5)的诱导表达条件,得到了较高产率的纯化蛋白.核磁共振(NMR)谱和圆二色谱(CD)揭示了Zn2+对稳定锌指蛋白结构的必要性,以及C2H2-Zn2+结合的组氨酸呈现为δ-异构方式.