"新吉富"罗非鱼免疫球蛋白单克隆抗体的制备及其在免疫效果评价上的应用

• 作者: 吴斌
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: '新吉富'罗非鱼 免疫球蛋白IgM 单克隆抗体 ELISA检测方法
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 187-191
• 页数: 5页
• 分类号: S948
• 语种: 中文
• DOI: 10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2017.02.011

摘要

制备了"新吉富"罗非鱼血清免疫球蛋白IgM单克隆抗体(McAb)并进行了特性分析,以血清IgM McAb为基础,建立了IgM捕获ELISA检测方法.采用亲和层析法纯化健康"新吉富"罗非鱼IgM,纯化蛋白经SDS-PAGE检测,重链、轻链的相对分子质量分别为75~78、23~25 ku;以纯化的IgM为抗原制备IgM McAb,制备McAb杂交瘤细胞株系3株,分别命名为2H5、2D4、2B11,抗体亚型均为IgM,小鼠腹水效价分别为1.0×10-5、1.0×10-4、1.0×10-5,对IgM敏感度测定表明,2H5、2D4、2B11检测灵敏度分别为31.25、125.00、62.50 ng.以抗罗非鱼IgM McAb包被酶标板,建立IgM捕获ELISA检测方法.以无乳链球菌灭活疫苗免疫罗非鱼,受免血清按建立的IgM捕获ELISA方法检测特异性抗体,结果表明,建立的IgM捕获ELISA检测方法可应用于免疫应答抗体水平分析.