禽源性大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 刘吉山 徐倩倩 沈志强 王艳萍 王金良 莫玲 董林 郭时金
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 禽源大肠杆菌 HPI 毒力岛 irp2基因
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 卫生检验
• 页码范围: 86-89
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61+2
• 语种: 中文

摘要

为了解临床禽源致病性大肠杆菌中高致病性毒力岛(High pathogenicity island HPI)流行情况和基因特征,根据GenBank已知禽源irp2基因序列,设计、合成一对特异性引物,建立irp2基因PCR检测方法,优化、确定PCR扩增特性,进行敏感性、特异性、重复性检测评价.对256份临床分离禽源大肠杆菌进行irp2基因PCR检测和基因遗传变异分析.结果显示,建立的PCR检测方法敏感性可达2.14×10-1 ng/μ L;特异性显示与鸡沙门菌、副鸡嗜血杆菌、鸭疫里默菌、禽巴氏杆菌、鸡毒支原体、鸡新城疫病毒、禽流感病毒(H9N5)核酸均无交叉反应;重复性显示3份阳性样品重复5次检测,变异系数3.4％～5.0％.256份临床样品PCR检测irp2基因,阳性率30.6％.获得了9株分离株irp2基因序列,分析显示,与Gen-Bank已知基因同源性高达96.2％以上.说明建立的禽源大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可应用于临床致病性大肠杆菌毒力岛基因快速检测.