香蕉MaASR1基因的生物信息学分析及原核表达

• 作者: 刘菊华 张丽丽 张建斌 徐碧玉 贾彩红 金志强
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: MaASR1基因 原核表达 生物信息学 蛋白质纯化
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 1129-1135
• 页数: 7页
• 分类号: S668.1
• 字数: 5316字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2017.05.026

摘要

为了深入研究MaASR1基因的分子生物学功能,利用RT-PCR技术从拟南芥转基因株系L14中克隆到MaASR1基因的cDNA序列,该序列含有1个432 bp的开放阅读框,编码143个氨基酸的蛋白质,并对该序列进行了生物信息学分析.将该基因克隆到原核表达载体PET-30a中,经酶切和测序鉴定后,将正确的重组质粒pET30a-MaASR1导入大肠杆菌BL21(DE3),成功构建了该基因的原核表达载体.利用所构建的原核表达载体进行原核表达,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳检测,结果表明表达蛋白质与预期蛋白质大小基本一致.利用Ni柱亲和层析方法进一步获得了纯度较高的重组蛋白质,并用Western blot方法确定此重组蛋白质为目的蛋白质.