凡纳滨对虾ARMC8基因的克隆及表达

• 作者: 刘泓宇 杨奇慧 章双 董晓慧 谭北平 迟淑艳 黄金凤
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 凡纳滨对虾 ARMC8基因 基因克隆 组织表达 WSSV感染 副溶血弧菌
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 页码范围: 171-181
• 页数: 11页
• 分类号: Q785|S945.4
• 字数: 6229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20160410376

摘要

为了研究含Armadillo重复蛋白8在凡纳滨对虾抗病感染过程中所起的免疫作用,本实验采用RACE-PCR技术首次克隆得到凡纳滨对虾ARMC8基因(LvARMC8,GenBank注册号:KX058562)的cDNA序列全长,并利用在线软件进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR (Rt-PCR)技术对LvARMC8基因在凡纳滨对虾不同组织及感染白斑综合征病毒和副溶血弧菌过程中的表达变化特征进行分析.结果显示,LvARMC8基因全长为2917bp,其中开放阅读框长2046bp,编码681个氨基酸,5'非编码区长49bp,3'非编码区长822 bp.预测分析显示LvARMC8编码的蛋白质含有6个ARM结构域.同源性分析发现,LvARMC8基因与内华达古白蚁ARMC8基因的相似度最高,为71％.系统进化分析结果显示,LvARMC8和多种无脊椎动物ARMC8聚为一支,其中与昆虫类动物赤拟谷盗、致倦库蚊和柑橘凤蝶的亲缘关系最近.Rt-PCR分析发现,LvARMC8基因在凡纳滨对虾多个组织中均能检测出,在表皮中表达量最高,眼柄中表达量最低.WSSV感染后12h,LvARMC8基因在凡纳滨对虾血液中的表达量显著降低,但48 h后显著升高,72 h达到最高水平.除副溶血弧菌感染后24 h外的时间点,LvARMC8基因在凡纳滨对虾血液中的表达量均显著升高.研究表明,LvARMC8基因可能参与凡纳滨对虾抗病免疫应答途径.