家蚕Met1基因的表达与组织定位分析

• 作者: 冯启理 刘琳 易文瑾 温众杰 邓惠敏 马琼
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 BmMet1基因 表达特征 翅原基 保幼激素类似物
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 757-763
• 页数: 7页
• 分类号: Q786|S881.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2017.05.009

摘要

选择家蚕基因组中与果蝇DmMet(Methoprene tolerant protein)同源的基因BmMet1进行研究.预测DmMet和BmMet1的结构域均是一个bHLH-PAS(basic helix-loop-helix Per-ARNT-SIM)型转录因子,具有典型的DNA结合结构域.在原核系统表达获得了BmMet1蛋白并制备了抗体.qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,无论是BmMet1基因mRNA的转录还是BmMet1蛋白的表达,在家蚕5龄中后期和吐丝期的翅原基组织中都呈现较高水平,而在蛹期呈现较低的水平.通过免疫组织化学方法分析BmMet1的组织定位,结果显示该蛋白质在5龄第6天和吐丝期家蚕胸节表皮、脂肪体及翅原基等组织中都有较高水平的表达,在蛹期上述部位和组织的表达水平较低.分别将蜕皮激素(20E)和保幼激素类似物(Methoprene)按照2μg/头的剂量注射到5龄第3天幼虫第2～3胸节间,qRT-PCR检测幼虫翅原基组织中的BmMet1受到Methoprene的诱导上调表达,且在处理2h后表达水平最高.上述结果暗示BmMet1可能参与了保幼激素对家蚕翅原基生长分化的调控.