氟对小鼠骨组织白细胞介素-6/糖蛋白130信号通路表达的影响

• 作者: 包莹 李俊骏 李冰洋 李悦 杨庆 杨艳梅 江伟 褚衍茹 陈富讯
• 来源期刊: 中华地方病学杂志
• 关键词: 氟 小鼠 白细胞介素-6 糖蛋白类 骨和骨组织
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 94-99
• 页数: 6页
• 字数: 4993字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-4255.2017.02.005

摘要

目的 观察氟对小鼠骨组织白细胞介素-6 (IL-6)、糖蛋白130(gp130)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)表达的影响,探讨IL-6/gp130信号通路在氟致骨骼损伤中的作用机制.方法 64只雄性Balb/c小鼠,按体质量采用随机数字表法分成4组,每组16只.对照组饮用蒸馏水,低、中、高氟组分别饮用含氟量为25、50、100 mg/L的蒸馏水.饲养3个月,建立饮水型氟中毒模型,观察小鼠氟斑牙发生情况,镜下观察氟中毒小鼠骨组织形态学改变及细胞超微结构变化.采用氟离子选择电极法检测脊柱骨氟含量;微量酶标法检测血清碱性磷酸酶(ALP)和酸性磷酸酶(ACP)活性;酶联免疫吸附法检测血清IL-6含量;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测长骨组织IL-6、gp130、PI3K、Akt的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测长骨组织gp130、PI3K、Akt的蛋白表达水平.结果 低、中、高氟组小鼠氟斑牙检出率分别为62.5％(10/16)、100.0％(15/15)、100.0％(16/16),均明显高于对照组(0,0/15,P均＜0.05).骨氟含量随着染氟剂量增加而增加(F=309.716,P＜ 0.05).光镜下,染氟组骨小梁明显增粗、紊乱,密度增加,呈骨质硬化;骨小梁面积百分比随着染氟剂量增加而增加(F=25.161,P＜0.05).电镜下,高氟组成骨细胞、破骨细胞明显肿胀,内质网扩张,染色质边集,细胞超微结构明显受损.血清ALP、ACP活性随染氟剂量增加而增加(F=19.586、13.329,P均＜0.05),其中高氟组[(8.05±1.10)、(10.95±1.85)金氏单位]、中氟组[(6.48±0.92)、(9.18±0.76)金氏单位]明显高于对照组[(5.15±0.73)、(7.49±0.66)金氏单位,P均＜0.05].对照组和低、中、高氟组血清IL-6水平[(5.98±1.43)、(7.54±2.16)、(5.25±1.97)、(6.31±1.36)ng/L]组间比较差异有统计学意义(F=3.840,P＜0.05),其中低氟组明显高于对照组(P＜0.05),中氟组明显低于低氟组(P＜0.05).长骨组织IL-6、gp130、PI3K、AktmRNA表达组间比较差异有统计学意义(F=9.952、8.954、6.997、21.504,P均＜0.05),其中高氟组(0.59±0.42、0.46±0.22、0.55±0.30、0.61±0.10)均明显低于对照组(1.10±0.54、1.16±0.67、1.20±0.84、1.06±0.37)和低氟组(1.86±0.63、1.61±0.64、1.74±0.65、1.70±0.58,P均＜0.05),除gp130外,各指标低氟组均明显高于对照组(P均＜ 0.05).长骨组织gp130、PI3K、Akt蛋白表达水平组间比较差异有统计学意义(F=4.777、7.479、3.535,P均＜0.05),其中低氟组(0.66±0.10、0.69±0.12、0.92±0.09)均明显高于对照组(0.51±0.11、0.47±0.06、0.66±0.14,P均＜0.05),高氟组(0.42±0.11、0.38±0.06、0.67±0.14)均明显低于低氟组(P均＜0.05).结论 氟中毒小鼠骨组织IL-6、gp130、PI3K、Akt的mRNA和蛋白表达均有变化,提示IL-6/gp130信号通路可能参与了氟致骨骼损伤机制.