蝗虫微孢子TaqMan探针Real-time PCR检测新方法

• 作者: 叶小芳 季荣 扈鸿霞 赵贝 郑秋英
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 蝗虫微孢子 Real-time PCR TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 796-802
• 页数: 7页
• 分类号: S476.1
• 字数: 3244字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2017.06.012

摘要

蝗虫微孢子已被广泛运用于蝗虫防治.本研究采用蝗虫微孢子保守性高的小核糖体亚单位RNA为目的基因,将其克隆到pMD18-T载体上构建重组质粒,制备质粒标准品.设计一对特异性引物和TaqMan探针,并对引物浓度、探针浓度分别进行了优化,建立了蝗虫微孢子TaqMan实时荧光定量PCR检测方法.该检测方法的灵敏度达1.29×105 copies/L,各浓度质粒标准品的组内和组间重复的变异系数均小于1％.这里建立的蝗虫微孢子TaqMan探针荧光定量PCR检测方法较快速、简便和准确,适用于生产中蝗虫微孢子的快速检测.