中国小麦花叶病毒(CWMV)复制酶基因在病株体内的表达分析

• 作者: 张恒木 张芬 李静 羊健 蔡年俊 陈剑平
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中国小麦花叶病毒 多克隆抗体 复制酶
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 640-646
• 页数: 7页
• 分类号: S432.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000110

摘要

中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)是引起我国小麦花叶病的重要病原之一,其基因组由2条单链正义RNA片段(RNA1-2)组成.本研究根据发表的基因组序列设计特异性引物,扩增了CWMV复制酶基因的部分片段(nt102～1101),并克隆至原核表达载体pGEX-6P1,然后导入大肠杆菌E.coli BL21(DE3) pLysS中诱导表达.重组的复制酶蛋白经亲和层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体.Western-blot分析表明该抗体具有高度的特异性,能用于病株体内CWMV复制酶蛋白的检测.检测分析显示在病株体内,CWMV基因组RNA1可直接充当其复制酶基因的mRNA;在感染的细胞中,其复制酶组分主要是RNA1 ORF1编码的蛋白,分子量约153 kDa,且特异性地定位于膜结构上.