应用LC3B-PLA2研究Atg4B对LC3B的切割作用

• 作者: 叶棋浓 张立 徐小洁 洪甜 闫志风
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: LC3B-PLA2 Atg4B 自噬 重组质粒
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 490-494
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 2958字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2017.04.016

摘要

目的:构建带Myc标签的LC3B-PLA2基因的真核表达质粒,获得LC3B-PLA2融合蛋白,并应用LC3B-PLA2研究Atg4B对LC3B的切割作用.方法:以本实验室保存的乳腺文库为模板,PCR扩增获得LC3B序列,与PLA2G10拼接后插入pCMV-Myc载体,用构建的重组质粒转染HEK293T细胞,Western印迹检测融合蛋白的表达,用LC3B-PLA2与Atg4B共转染的方法检测Atg4B对LC3B的切割作用.结果:菌液PCR、重组质粒双酶切及测序均表明重组质粒构建成功,Western印迹结果表明融合蛋白在HEK293T细胞中获得表达,LC3B-PLA2真核表达蛋白能够应用于Atg4B对LC3B切割作用的研究.结论:构建了pCMV-Myc-LC3B-PLA2真核表达质粒,LC3B-PLA2融合蛋白在Atg4B对LC3B切割作用的研究中至关重要,为进一步研究Atg4B在自噬过程中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶棋浓	军事医学科学院生物工程研究所	138	519	11.0	17.0
2	徐小洁	军事医学科学院生物工程研究所	51	112	6.0	7.0
3	洪甜	军事医学科学院生物工程研究所	5	1	1.0	1.0
4	闫志风	中国人民解放军总医院妇产科	5	12	2.0	3.0
5	张立	总参警卫局卫生保健处	8	13	2.0	3.0