新生大鼠Ⅰ型肺泡上皮细胞原代培养方法的改进

• 作者: 徐菲菲 王廷华 胡远东 蒋玲
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: Ⅰ型肺泡上皮细胞 原代培养 鉴定
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 282-285,308
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的 改进体外SD大鼠Ⅰ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial type Ⅰ,ATⅠ)的原代培养方法,用更为简单的培养方法获得较高纯度的ATⅠ.方法 选用新生1d的SD大鼠,消毒后待新生大鼠呼吸停止后断头取肺,采用胶原酶Ⅰ和DNase Ⅰ消化分离法获取原代细胞,将细胞接种在Ⅰ型鼠尾胶原蛋白包被过的细胞板中,利用差速贴壁法纯化AT Ⅰ,同时细胞培养48 h后进行换液,倒置显微镜下观察细胞的生长状态,用细胞水通道蛋白5(AQP5)、肺表面活性物质相关蛋白(SPC)、植物凝集素(BSI)、波形蛋白(Vimentin)4种肺细胞的特异性表达产物鉴定细胞.结果 接种2d时,细胞开始贴壁生长.4～6 d对细胞开始增殖,呈现梭形、立方形、多角形等多种形态.8d时细胞增殖能力达到最大,细胞活力为(87±8)％,细胞纯度为(87±5)％.结论 对组织取材、分离和培养进行改进可获得产量高、生长状态好、纯度高的AT Ⅰ.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王廷华	四川大学华西医院麻醉科	43	118	6.0	8.0
5	蒋玲	四川大学华西医院麻醉科	4	7	2.0	2.0
6	胡远东	四川大学华西医院麻醉科	3	4	1.0	2.0
7	徐菲菲	四川大学华西医院麻醉科	2	4	1.0	2.0