活性维生素D3在大鼠肺纤维化发生发展中的作用及对miR-29a表达的影响

• 作者: 倪娜 刘乃国 王楠 董洪亮 许梦婷 郑静
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 活性维生素D3 miR-29a 肺纤维化 实时定量聚合酶链反应 Masson染色 免疫组织化学 大鼠
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 组织学胚胎学发育生物学
• 页码范围: 78-86
• 分类号: R363.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2017.01.014

摘要

目的 探讨活性维生素D3[1,25 (OH)2D3]在大鼠肺纤维化发生发展中的作用及对miR-29a的影响.方法 150只SD雄性大鼠随机分为纤维化发生干预组(90只)和纤维化后干预组(60只),纤维化发生干预组分为模型组Ⅰ、给药组Ⅰ和对照组Ⅰ(n =30),纤维化后干预组分为模型组Ⅱ、给药组Ⅱ和对照组Ⅱ(n=20).模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ经气管注入博来霉素(5mg/kg)建立肺纤维化模型,对照组Ⅰ/Ⅱ经气管注入等体积生理盐水.给药组Ⅰ/Ⅱ分别于手术后第2天和第14天腹腔注射活性维生素D3,模型组Ⅰ/Ⅱ分别于手术后第2天和第14天腹腔注射等量的活性维生素D3溶剂(0.1％乙醇和99.9％的丙二醇),对照组Ⅰ/Ⅱ分别在术后第2天和第14天腹腔注射等量的生理盐水.各种处理均为两天1次.纤维化发生干预组分别于手术后第14天、第21天和第28天处死大鼠取材,纤维化后干预组分别于手术后第21天和第28天处死大鼠取材,各小组每个时间点10只大鼠.用Masson染色法观察各组实验大鼠肺中胶原纤维的差异,用碱水解法检测羟脯氨酸含量的变化,用实时定量PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(Col)Ⅰ mRNA及miR-29a的相对表达量,用免疫组织化学方法检测α-SMA和ColⅠ蛋白质表达水平,并经图像分析进行量化.结果 博来霉素处理后,第14天大鼠肺部已经出现纤维化,随着时间推移,纤维化进一步加重.模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中的羟脯氨酸含量、α-SMA和Col Ⅰ的mRNA和蛋白质表达都明显高于对照组Ⅰ/Ⅱ,而其miR-29a表达与对照组Ⅰ/Ⅱ相比则明显减少.给药组Ⅰ/Ⅱ中miR-29a的表达与模型组Ⅰ/Ⅱ相比有所增加(P＜0.05).在纤维化发生干预组中,与模型组Ⅰ相比,给药组Ⅰ在3个时间点羟脯氨酸含量、α-SMA 、Col Ⅰ的mRNA和蛋白质表达都显著降低(P＜0.05),但在纤维化后干预组中的给药组Ⅱ中羟脯氨酸含量、α-SMA、Col Ⅰ的mRNA和蛋白质表达比模型组Ⅱ虽有所降低,但差异无显著性(P＞0.05).结论 活性维生素D3对大鼠肺纤维化的发生发展具有一定的抑制作用,其预防效果更好一些,并且能促进miR-29a的表达,活性维生素D3可能是通过促进miR-29a的表达来抑制肺纤维化的发生发展.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘乃国	滨州医学院附属医院临床医学实验室	33	121	7.0	9.0
2	郑静	滨州医学院附属医院临床医学实验室	26	66	4.0	6.0
3	董洪亮	滨州医学院附属医院临床医学实验室	13	41	3.0	5.0
4	倪娜	滨州医学院附属医院临床医学实验室	13	37	3.0	5.0
5	王楠	滨州医学院附属医院临床医学实验室	9	28	3.0	5.0
6	许梦婷	滨州医学院附属医院临床医学实验室	3	10	2.0	3.0