C19orf18蛋白的表达与纯化及多克隆抗体制备

• 作者: 杨远勤 王怀远 章康健 童霄霞 胡海军 陈勉
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: C19orf18蛋白 原核表达 抗原亲和纯化
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 176-182
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016-1031

摘要

旨在得到较高浓度和纯度的C19orf18蛋白,再将得到的目的蛋白用于制备其特异性的多克隆抗体.利用PCR技术扩增出C19orf18基因的胞内段和胞外段,中间用柔性肽连接,再将目的片段克隆到pET28a(+)与pET32a(+)载体上,通过诱导表达少量的目的蛋白,筛选出表达量较高的载体,再用筛选得到的表达量较高的载体大量表达目的蛋白,通过镍柱纯化得到较纯的C19orf18蛋白.用得到的蛋白免疫新西兰白兔,得到的抗血清先经过Protein A纯化,再进行抗原亲和纯化得到C19orf18蛋白多克隆抗体.结果显示,载体pET28a-C19orf18蛋白表达量高于pET32a-C19orf18,经过镍柱纯化后得到了较高浓度与纯度的目的蛋白,利用得到的目的蛋白作为抗原成功制备了其特异性的多克隆抗体.在原核细胞中成功表达了C19orf18重组蛋白,并得到了其特异性多克隆抗体,所制备的多克隆抗体可应用于ELISA、蛋白免疫印迹实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈勉	中国科学院上海生命科学研究院生化细胞所	2	0	0.0	0.0
2	章康健	中国科学院上海生命科学研究院生化细胞所	3	9	2.0	3.0
4	杨远勤		6	10	2.0	3.0
5	胡海军	中国科学院上海生命科学研究院生化细胞所	3	47	2.0	3.0
6	童霄霞		1	0	0.0	0.0
7	王怀远	中国科学院上海生命科学研究院生化细胞所	1	0	0.0	0.0