慢病毒载体过表达Klotho基因对骨髓间充质干细胞在慢性心衰大鼠心肌中存活率的影响

• 作者: 尹娜 朱向情 杨晓华 潘兴华 王欢 魏玲
• 来源期刊: 心脏杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心力衰竭 Klotho基因 骨髓间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 641-646
• 页数: 6页
• 分类号: R541.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.13191/j.chj.2017.0159

摘要

目的 探讨以重组慢病毒为载体转染Klotho基因(抗衰老基因)对SD大鼠心肌中骨髓间充质干细胞(bone marrow Mesenchymal stem cells,BMSCs)存活率及其可能的机制.方法 全骨髓贴壁培养法体外培养SD大鼠BMSCs;以重组慢病毒为载体将KLotho基因转染至大鼠BMSCs,用RT-PCR鉴定BMSCs中Klotho基因mRNA的表达;腹腔连续注射异丙肾上腺素建立SD大鼠心衰模型;并随机分为3组,即EGFP-Klotho-BMSCs组(慢性心衰SD大鼠尾静脉注射Klotho基因修饰的BMSCs),EGFP-BMSCs组(慢性心衰SD大鼠尾静脉注射空载慢病毒转染的BMSCs),生理盐水组(慢性心衰SD大鼠尾静脉注射与等容积的生理盐水).细胞移植治疗4周后,在荧光显微镜下观察各组大鼠心肌组织绿色荧光蛋白的表达情况,RT-PCR检测各组大鼠心肌组织中Klotho基因的表达.结果 ①全骨髓贴壁法成功培养及传代BMSCs;②以重组慢病毒为载体成功将Klotho基因转染到BMSCs,荧光显微镜下第4天的细胞转染效率达70％～80％以上;③RT-PCR结果表明与EGFP-BMSCs组比较,EGFP-Klotho-BMSCs组的BMSCs中Klotho基因表达明显增多(P＜0.05);④干细胞移植4周后,EGFP-Klotho-BMSCs组和EGFP-BMSCs组大鼠心肌组织中仍可见EGFP绿色荧光表达,且EGFP-Klotho-BMSCs组心肌组织中绿色荧光表达数量较EGFP-BMSCs组显著增多.结论 转染Klotho基因可有效提高BMSCs在SD大鼠心肌中的存活率,其可能的机制为Klotho基因具有抗细胞凋亡及改变心肌内环境的作用.