原发性开角型青光眼患者小梁细胞中GRP78和Myocilin蛋白的共表达

• 作者: 李娟 杨新光 柴芳 艾华
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 开角型青光眼/病理 内质网/代谢 糖蛋白/代谢 小梁网/病理 肌纤蛋白 细胞培养 人
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 300-305
• 页数: 6页
• 字数: 4909字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2017.04.004

摘要

背景 Myocilin蛋白的错误折叠是原发性开角型青光眼(POAG)的重要发病机制,GRP78能将错误折叠的蛋白质转移到内质网外,以保持应激状态下内质网蛋白质合成功能的正常运转,但二者的相互关系及其在POAG发病中的作用机制仍未阐明. 目的 检测体外培养的POAG患者小梁细胞内GRP78与Myolicin蛋白的共定位表达.方法在手术中获取POAG患者的小梁网组织,采用组织块培养法分离和培养小梁细胞,采用免疫化学染色法检测培养的细胞中特征性因子的表达,并将其形态学特征与健康供体眼培养的小梁细胞进行比较.将体外培养的小梁细胞分为衣霉素(Tm)组、十字孢碱(STS)组和正常对照组,分别在培养液中加入含有1 μmol/L Tm、0.1μmol/L STS和不含药物的培养液培养细胞24 h,采用免疫荧光法检测各组培养的细胞中GRP78与Myocilin蛋白的共表达情况. 结果 培养的原代细胞多呈扁平星形或不规则形,可见细胞突起,细胞核呈椭圆形,细胞体较大,细胞质丰富,可见大量黑色吞噬颗粒.POAG来源小梁细胞培养3～7代生长良好,细胞中层黏连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)、神经烯醇化酶(NSE)和波形蛋白(Vimentin)均呈阳性表达.免疫荧光染色结果显示,Tm组、STS组和正常对照组细胞的细胞质中均可见GRP78和Myocilin阳性表达,分别为红色和绿色荧光,正常对照组中人来源小梁细胞的周边部可见GRP78和Myocilin的不完全共表达,POAG来源小梁细胞周边部GRP78和Myocilin呈完全共表达;Tm组和STS组中不同来源的小梁细胞中GRP78和Myocilin均呈完全共表达,Tm组中不同来源小梁细胞均出现细胞核周围GRP78蛋白聚集现象. 结论 POAG来源小梁细胞中GRP78蛋白与Myocilin蛋白共表达,提示二者在POAG的发病和进展过程中可能存在相互作用.GRP78可能保护小梁细胞免受内质网应激途径诱导的细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	艾华	西安市第四医院眼科	17	41	4.0	5.0
2	李娟	西安市第四医院眼科	45	113	6.0	9.0
3	杨新光	西安市第四医院眼科	44	198	7.0	11.0
4	柴芳	西安市第四医院眼科	10	8	2.0	2.0