树鼩角膜原代上皮细胞的分离培养、纯化与鉴定

• 作者: 代解杰 匡德宣 宋庆凯 尹博文 李晓飞 苗雨润 陈玲霞
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 树鼩 角膜上皮细胞(CECs) 原代培养 优化 鉴定
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 130-135
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4487字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.02.009

摘要

目的 建立树鼩角膜上皮细胞(CECs)稳定的体外培养技术,为人类角膜疾病研究提供新的实验材料.方法 使用改进的双酶消化法取得树鼩CECs,用转化生长因子-β(TGF-β)抑制剂配合梯度消化对树鼩CECs进行纯化,角蛋白3/12抗体对CECs进行免疫荧光检测及鉴定.结果 优化的酶消化法可以快速、有效得到高纯度的树鼩CECs. TGF-β抑制剂及梯度消化法可以达到良好的纯化目的,纯化的CECs在传代过程中仍保持良好形态.树鼩CECs免疫荧光染色显示角蛋白3/12单克隆抗体阳性.结论 成功建立了一种有效、简单、经济适用的树鼩角膜上皮原代细胞的体外培养技术,所获得的原代细胞具有较好的上皮细胞形态特征并可以连续传代,为眼科疾病的研究提供一种新材料.