miR-21对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间质转分化的影响

• 作者: 朱科燕 王德军 蔡月琴 褚燕青 陈诚
• 来源期刊: 中国应用生理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-21 HK-2细胞 转化生长因子-β1 上皮间质转分化
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 346-350
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4089字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12047/j.cjap.5477.2017.084

摘要

目的:观察miR-21在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)上皮间质转分化(EMT)中的作用,并探讨miR-21参与调控HK-2细胞EMT的可能靶点.方法:体外培养的HK-2细胞分为6组:正常对照组、转化生长因子β1(TGF-βl)模型组、miR-21 mimic阴性组、miR-21 mimic组、miR-21 inhibitor阴性组和miR-21inhibitor组.细胞经4 ng/ml TGF-β1处理建立EMT模型,检测miR-21和EMT相关指标的表达变化,利用基因转染技术,将miR-21 mimic质粒或miR-21 inhibitor质粒转染经TGF-β1处理的HK-2细胞,使细胞过表达或抑制表达miR-21,在此基础上观察细胞EMT相关指标的变化以及磷酸酯酶(PTEN)基因的影响.结果:①与正常组相比,模型组的miR-21含量显著升高(P＜0.05),上皮表型标志物E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01),间质表型标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白水平也显著升高(P＜ 0.05,P＜0.01);②转染miR-21 mimic后,与miR-21 mimic阴性对照组相比,miR-21含量显著升高(P＜0.01),PTEN、E-cadherin的mRNA和蛋白水平显著降低(P＜ 0.05,P＜0.01),α-SMA mRNA和蛋白水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01);转染miR-21 inhibitor后,与miR-21inhibitor阴性对照组相比,miR-21含量显著降低(P＜0.01),PTEN、E-cadherin的mRNA和蛋白含量显著升高(P＜0.05,P＜0.01),α-SMA mRNA、蛋白水平显著降低(P＜ 0.05,P＜0.01).结论:miR-21在TGF-β1诱导的HK-2细胞EMT发生中具有重要作用,并且可能通过靶基因PTEN参与EMT相关分子的表达调控.