奇异变形杆菌JN458 D-乳酸氧化酶的性质研究

• 作者: 沈天成 白亚军 蔡宇杰 郑晓辉
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 奇异变形杆菌JN458 D-乳酸氧化酶 酶学性质 生物信息学分析 高效表达
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 开发与应用
• 页码范围: 383-389
• 页数: 7页
• 分类号: Q784|Q785|Q786|Q814.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.04.0062

摘要

[目的]对奇异变形杆菌JN458 D-乳酸氧化酶进行酶学性质研究.[方法]克隆D-乳酸氧化酶基因(lodD),构建重组质粒在大肠中表达,生物信息学初步分析D-乳酸氧化酶氨基酸序列,镍柱纯化该酶并研究其性质.[结果]生物信息学分析该酶C-末端含膜结合结构域,所以是膜蛋白,属于以醌作为电子受体的D-乳酸氧化酶.最适温度60 cc,50℃下保持稳定1h,中高温适应性较好.最适pH 7,pH 7 ～9下保持稳定1h.以D-乳酸为底物时Km值为0.61 mmol/L,对D-乳酸有很高的亲和力.Fe2+、Mn2+和Mg2+在1～6 mmol/L的浓度内能提高酶活,其中Fe2+效果最好.[结论] lodD在大肠中实现了高效表达,使新型D-乳酸氧化酶的应用有了理论依据.