靶向鸭肠炎病毒NP基因RNAi对DEV增殖的影响

• 作者: 万润 华敏 吴良涛 周碧君 文明 杨琦 熊朝丽 程振涛 罗乐 郑敏
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭肠炎病毒 核衣壳蛋白 RNA干扰 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 132-139
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 4295字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2017.01.016

摘要

为探究核衣壳蛋白(NP)对鸭肠炎病毒(DEV)增殖的影响,笔者根据GenBank上DEV-NP基因序列,设计并构建pSilencer-DEV-NP,采用三种不同方式处理转染鸭胚成纤维(DEF)细胞后,应用荧光显微镜法和FQ-PCR法分析pSilencer-DEV-NP对DEV增殖的影响,结果显示:经荧光显微镜法观察,pSilencer-DEV-NP 1～4在DEF细胞中均呈现绿色荧光;FQ-PCR法扩增并计算,pSilencer-DEV-NP-1～4对DEV增殖的沉默效率分别为81.10％、72.69％、77.35％和67.69％;采用三种方法处理,pSilencer-DEV-NP-1对DEF细胞中DEV的增殖均有沉默作用,但沉默效率不尽一致,其中先后转染后感染时pSilencer-DEV-NP-1的沉默效果最好,在处理60 h时沉默效率高达69.20％;同时转染和感染时pSilencer-DEV-NP-1的沉默效果次之,在处理48 h时沉默效率最好仅达63.79％;先感染后转染时pSilencer-DEV-NP-1的沉默效果较差,在处理60 h时沉默效率最高仅为52.58％.上述研究结果提示,核衣壳蛋白对鸭肠炎病毒增殖具有一定的影响,为阐明核衣壳蛋白在鸭肠炎病毒复制与增殖的作用机制奠定了理论基础.