人类免疫缺陷病毒1型gp140包膜蛋白三聚体在哺乳动物细胞中的高效表达及其性质鉴定

• 作者: 夏宁邵 张芝晴 李少伟 李少勇 杨超 沈鸿霖 顾颖 高双全
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) 包膜糖蛋白gp140 真核表达 密码子优化
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 人类病毒研究论著
• 页码范围: 541-549
• 页数: 9页
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文

摘要

本研究目的是通过优化1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1) gp140编码基因的密码子和克隆设计,从而实现在293T哺乳动物细胞中高效表达,并对纯化获得的gp140蛋白进行抗原性质鉴定.在本研究中选择HIV-1 B亚型NL4-3全基因序列为模板进行gp140克隆构建,通过密码子优化、信号肽替换、增加柔性1inker、三聚体折叠序列等方法优化设计.通过HIV-1转录反式激活因子tat共转HEK293T细胞进行gp140蛋白表达,采用镍柱纯化.SDS-PAGE、Western blot、ELISA、负染电镜等结果显示目的蛋白纯度高于70％,每升培养基可获得0.5 mg gp140蛋白,并且具有良好的抗原活性,电镜下呈现三聚体结构.通过弗氏佐剂与目的蛋白混合免疫Balb/c小鼠,检测小鼠免疫血清显示gp140蛋白能有效刺激机体产生免疫应答.本研究通过优化表达获得B亚型HIV-1 NL4-3 gp140蛋白,为HIV-1病毒包膜蛋白结构和重组疫苗研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏宁邵		87	628	14.0	23.0
2	李少伟		23	99	4.0	9.0
3	杨超		1	0	0.0	0.0
4	张芝晴		2	0	0.0	0.0
5	沈鸿霖		2	0	0.0	0.0
6	高双全		1	0	0.0	0.0
7	李少勇		1	0	0.0	0.0
8	顾颖		8	17	3.0	4.0