人血清中非Gal异种抗体检测方法的探讨

• 作者: 卢希彬 叶学军 潘登科 牟丽莎 蔡志明 赵成江
• 来源期刊: 器官移植
• 学科: 医学
• 关键词: 异种移植 外周血单核细胞 非Gal抗原 流式细胞术 IgM/IgG α-1,3-半乳糖基转移酶 基因敲除 五指山小型猪
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 132-137
• 页数: 6页
• 分类号: R-332|R617
• 字数: 3988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7445.2017.02.008

摘要

目的 探讨人血清中抗非半乳糖(Gal)异种抗原抗体的最佳检测条件.方法 选用α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)五指山小型猪的外周血单核细胞(PBMC)作为靶细胞,与健康人血清混合,在不同血清浓度(4.8％、16.7％、100％)和孵育时间(0.5、1.0、2.0、3.0、6.0h)条件下,利用流式细胞仪检测GTKO猪的PBMC上结合IgM和IgG的水平.结果 在16.7％血清浓度下,孵育时间从0.5 h延长至3.0 h,能显著提高非Gal IgM结合PBMC的水平(P＜0.01),而IgG水平的提高则差异无统计学意义(P＞0.05).提高血清浓度也可提高非Gal IgM的结合水平,采用100％的血清浓度孵育3h,IgM结合PBMC水平最高且有统计学意义(P＜0.01).采用100％的血清孵育6h,IgG结合水平升高有统计学意义(P＜0.05).延长孵育时间和提高血清浓度不会影响PBMC的活力.结论 检测人血清中抗非Gal异种抗原抗体的最佳条件为每1×105个猪PBMC,采用100％人血清浓度孵育3h检测IgM水平,或加100％人血清浓度孵育6h检测IgG水平.这一条件的优化有助于筛选非Gal表达抗原低表达的供体猪.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡志明		33	59	5.0	5.0
3	潘登科	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	32	131	8.0	10.0
4	牟丽莎		4	2	1.0	1.0
8	叶学军		2	3	1.0	1.0
11	卢希彬		1	2	1.0	1.0
12	赵成江		1	2	1.0	1.0