蔗糖磷酸化酶全细胞催化AA-2G的条件优化

• 作者: 余磊 李骥璇 王忆茗 王洪钟 郑桂兰
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 化学
• 关键词: 蔗糖磷酸化酶 AA-2G 全细胞催化
• 年，卷（期）: 2017,（14）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2601-2605
• 页数: 5页
• 分类号: O629.13|R-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2017.14.001

摘要

目的:使用表达蔗糖磷酸化酶(EC 2.4.1.7,Sucrose phosphorylase,SPase)的大肠杆菌重组工程菌E.coli BL21/pET-spase,作为全细胞催化剂,合成2-O-D-吡喃葡糖基-L-抗坏血酸(Ascorbic acid 2-glucoside,AA-2G).通过反应条件的优化研究,提高AA-2G的收率.方法:分别考察菌体量、缓冲液pH、蔗糖浓度、维生素C浓度、反应时间和温度对AA-2G合成反应的影响,再组合上述最佳条件进行反应.AA-2G的产量使用高效液相色谱法进行定量.结果:最佳反应条件为:菌体量15 mg/mL,缓冲液pH 4.5,蔗糖浓度100 g/L,维生素C浓度175 g/L,反应时间20 h,温度37℃.在此条件下,AA-2G产量达到了35.7 g/L.结论:以蔗糖为底物,使用SPase合成AA-2G的研究报道较少.本研究通过优化此方法的反应条件,让AA-2G的产量得到了大幅提高.同时本研究中成功地采用了大肠杆菌工程菌作为全细胞催化剂,这比传统的使用粗酶液的方法更省时省力,有良好的应用潜力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪钟	清华大学生命科学学院	27	137	6.0	11.0
2	郑桂兰	清华大学生命科学学院	10	52	3.0	7.0
3	余磊	清华大学生命科学学院	11	54	5.0	7.0
4	王忆茗	复旦大学附属中山医院骨科	4	21	2.0	4.0
5	李骥璇	清华大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0