摘要:
目的 研究虎杖苷对2型糖尿病小鼠溃疡创面愈合的作用效果.方法 C57BL/6J雄性小鼠持续喂以高脂饲料4周后,禁食12 h,腹腔注射链脲佐菌素40 mg·kg-1体重,连续注射5d,1周后,测量随机血糖值高于16.67mmoL·L-1的小鼠为2型糖尿病小鼠.在小鼠背部正中两侧各剪一个0.8 cm的圆形创面深至筋膜,造成小鼠溃疡创面模型.按照血糖值随机将小鼠分为3组:高低2个剂量实验组、对照组,每组15只.造模当天创面局部给药且为实验第1天(实验周期共14 d),实验组分别局部给与400,100 μg·mL-1虎杖苷100μL,每天给药一次,连续给药5d,第6~ 14天停止给药;对照组给予等量0.9%NaCl.计算实验第3,5,7,10,14天的创面愈合率,统计完全愈合时间,以HE染色观察实验第7,14天时组织形态学变化;以噻唑蓝(MTT)法与划痕实验测定虎杖苷组与磷酸盐缓冲液(PBS)对照组对成纤维细胞增殖趋化效果.以流式细胞仪测定虎杖苷组、白细胞介素-4组、虎杖苷+白细胞介素-4联用组、PBS对照组这4组的原代巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞量.结果 实验后第14天,高剂量实验组与对照组的创面愈合率分别是(80.72±5.33)%,(95.93±1.01)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.001).创面愈合时间:高剂量实验组与对照组分别为(16.6±1.1),(13.2±0.8)d,与对照组比较差异有统计学意义(P <0.001).实验后第14天,实验组的胶原纤维排列紧密整齐已愈合,对照组未愈合.实验组的促成纤维细胞增殖最佳浓度为0.5 μg· mL-1.实验第1天,实验组与PBS对照组的迁移率分别是(90.20±3.90)%,(76.8±4.87)%,与PBS对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),说明虎杖苷明显具有促成纤维细胞迁移作用.极化为M2型巨噬细胞百分比:实验组与PBS对照组分别是(3.7±0.36)%,(1.97±0.23)%,与PBS对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 虎杖苷具有促进2型糖尿病小鼠溃疡创面愈合的作用.