红麻TIR1基因克隆及其表达载体构建

• 作者: 周步进 周瑞阳 陈励虹
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 红麻 TIR1基因 克隆 实时荧光定量PCR 表达载体构建
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 1343-1350
• 页数: 8页
• 分类号: S563.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2017.08.03

摘要

[目的]分析红麻运输抑制剂响应蛋白1(TIR1)基因在不同组织和不同发育时期花药中的表达情况,并构建其超量表达载体和干扰载体,为研究该基因在雄蕊发育中的调控功能打下基础.[方法]根据红麻花药转录组数据,利用生物信息学方法,克隆TIR1基因cDNA序列,实时荧光定量PCR(qPCR)分析TIR1基因在红麻保持系722B和不育系722A根、茎、叶及不同发育时期花药中的表达情况,并构建超量表达载体和干扰载体.[结果]TIR1基因的开放阅读框(ORF)为1761 bp,编码586个氨基酸(GenBank登录号KY613992).qPCR检测结果显示,与不育系722B相比,不育系722A TIR1基因在四分体期花药中呈显著下调表达(P<0.05,下同),在茎和双核期花药中呈显著上调表达,在单核期花药中极显著上调表达(P<0.01);而在根和叶中,保持系722B和不育系722A中TIR1基因表达水平差异均不显著(P>0.05).超量表达载体pBI121-GFP-TIR1和干扰载体pART27-pK-Tz-Tf构建成功.[结论]红麻TIR1基因编码一个富含亮氨酸重复的F-box蛋白.红麻不育系722A的单核期花药TIR1基因表达较保持系722B极显著上调表达,可能与花药败育有关.构建的超量表达载体和干扰载体,可用于红麻TIR1基因功能及其与雄蕊发育的关系研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周瑞阳	广西大学农学院	116	786	14.0	20.0
2	周步进	广西大学农学院	7	18	3.0	4.0
3	陈励虹	广西大学农学院	2	0	0.0	0.0