miR-147靶向MDM2调控卵巢癌细胞Skov3增殖与凋亡的机制研究

• 作者: 柳家荣 王文义
• 来源期刊: 临床肿瘤学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢癌 微小RNA-147(miR-147) 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 118-123
• 页数: 6页
• 分类号: R737.31
• 字数: 4294字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨微小RNA-147(miR-147)靶向调控鼠双微粒体2蛋白(MDM2)的表达及其对卵巢癌细胞株Skov3增殖与凋亡的影响.方法 采用Lipo2000脂质体法将miR-147模拟物(mimics)及阴性对照(NC)转染至Skov3细胞并分为miR-147 mimics组和NC组,采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测转染48 h后Skov3细胞的miR-147水平以评价转染效果,分别采用MTT法及流式细胞术检测两组转染后的增殖及细胞凋亡情况,Western blotting检测两组MDM2、p53和caspase-3表达水平,采用双荧光素酶报告实验验证miR-147与靶标MDM2之间的靶向关系及结合位点.结果 QPCR检测显示,miR-147 mimics组miR-147的表达水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),提示在Skov3细胞中过表达miR-147成功.与NC组相比,miR-147 mimics组的增殖率和MDM2水平均降低,但凋亡率及p53和caspase-3水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);双荧光素酶报告实验检测发现miR-147可显著抑制野生型MDM2-3'端非翻译区(UTR)质粒转染细胞的荧光素酶活性,而对突变型MDM2-3'UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性并无影响.结论 miR-147可靶向MDM2的表达,且过表达miR-147表达可抑制Skov3细胞的增殖并诱导凋亡,在卵巢癌防治上有一定参考价值.