腺苷A2A受体激动剂联合骨髓间充质干细胞移植对急性肝功能衰竭小鼠负向免疫调节作用的研究

• 作者: 林镯 王晓东 王永林 肖茜茜 萧云蕾 许烂漫 陈永平 陈泽
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 关键词: 间质干细胞 肝功能衰竭,急性 受体,腺苷A2A Toll样受体4/核因子-κB信号通路
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-21
• 页数: 7页
• 字数: 5411字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2017.01.004

摘要

目的 探讨腺苷A2A受体激动剂(CGS21680)联合骨髓间充质干细胞(BMMSC)移植治疗急性肝功能衰竭(ALF)的疗效及可能机制.方法 50只6~8周雄性C57BL/6小鼠普通饲养1周后,采用随机数字法将小鼠分为健康对照组6只,模型对照组11只,BMMSC组11只,CGS21680/BMMSC组11只,CGS21680组11只.除健康对照组外,其余小鼠腹腔注射D-GalN和脂多糖建立ALF模型.10 h后, CGS21680/BMMSC组、CGS21680组腹腔注射腺苷A2A受体激动剂CGS21680(2.1 mg/kg).另外,BMMSC组、CGS21680/BMMSC组尾静脉注射BMMSC 1×10.6/只.24 h后,苏木精-伊红染色观察肝脏组织病理变化,流式细胞仪检测各组小鼠脾脏Treg占CD4+T淋巴细胞比例变化,ELISA试剂盒检测血清炎性因子IL-6、TNF-ɑ含量,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测肝组织TLR4、核因子-κB表达水平.应用单因素方差分析(one-way ANOVA)和SNK-q检验.结果 健康对照组血清IL-6为(23.67±2.97) pg/mL,模型对照组为(151.47±6.03) pg/mL,BMMSC组为(72.10±3.74) pg/mL,CGS21680/BMMSC组为(53.35±2.50) pg/mL,CGS21680组为(84.85±3.25) pg/mL,健康对照组与其他4组比较差异均有统计学意义(t值分别为46.02、25.51、19.58和34.03,均P<0.01).健康对照组血清TNF-ɑ水平为(24.62±3.19) pg/mL,模型对照组为(102.25±2.10) pg/mL、BMMSC组为(54.71±2.23) pg/mL,CGS21680/BMMSC组为(42.20±4.72) pg/mL,CGS21680组为(81.76±3.50) pg/mL,健康对照组与其他4组比较差异均有统计学意义(t值分别为46.49、19.97、7.72和29.57,均P<0.01).健康对照组脾脏Treg比例与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义(t值分别为51.67、12.22、5.91和18.21,均P<0.01).健康对照组肝组织TLR4 mRNA水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义(t值分别为26.31、21.33、13.24和27.14,均P<0.01);健康对照组肝组织核因子-κB mRNA水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义(t值分别为16.56、16.34、7.83和13.11,均P<0.01).健康对照组肝组织TLR4蛋白水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义(t值分别为35.60、10.38、6.05和18.02,均P<0.05);健康对照组肝组织NF-κB蛋白水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义(t值分别为10.80、7.30、4.61和13.24,均P<0.05).结论 腺苷A2A受体激动剂联合BMMSC移植可显著上调ALF小鼠体内Treg比例,抑制TLR4/核因子-κB通路的激活,两者协同调节作用,进而进一步抑制肝脏炎性反应.