稳定表达GFP-Parkin融合蛋白的SH-SY5Y细胞系的建立和功能初探

• 作者: 刘文华 林展乐 莫灿坤 赵海洲
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: Parkin蛋白 SH-SY5Y细胞 稳定表达 MPP+
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 429-434
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|R741.02
• 字数: 3707字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2017.04.005

摘要

目的:建立稳定表达GFP-Parkin的SH-SY5Y细胞系,并检测Parkin对Mpp+引起的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用.方法:将Parkin编码序列克隆到载体pEGFP-C1中,构建重组质粒pEGFP-Parkin,转染SH-SY5Y细胞,通过G418筛选,建立稳定表达GFP-Parkin的SH-SY5Y细胞系;荧光显微镜和Western印迹鉴定Parkin表达,MTT法检测Parkin对Mpp+致细胞损伤的保护作用.结果:酶切鉴定及测序结果表明重组质粒pEGFP-Parkin构建正确;荧光显微镜下可见细胞内有GFP-Parkin的融合表达,Western印迹检测发现相对分子质量79×103的蛋白条带;MTT结果显示Parkin能够减弱Mpp+对SH-SY5Y细胞的损伤,与对照组相比,存活率高约15％,差异显著(P＜0.05).结论:构建了稳定表达GFP-Parkin的SH-SY5Y细胞系,为进一步研究Parkin的细胞保护作用和其他功能机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵海洲	肇庆学院生命科学学院	8	12	2.0	3.0
2	刘文华	肇庆学院生命科学学院	18	15	2.0	3.0
3	莫灿坤	肇庆学院生命科学学院	11	61	5.0	7.0
4	林展乐	肇庆学院生命科学学院	1	0	0.0	0.0