3种鼠源致病菌多重PCR检测方法的建立

• 作者: 张诗渝 郭滨
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 沙门菌 肺炎克雷伯菌 金黄色葡萄球菌 多重PCR
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 82-86
• 页数: 5页
• 分类号: S852
• 字数: 4039字
• 语种: 中文

摘要

本研究以沙门菌组氨酸转运操纵子hut基因、肺炎克雷伯菌外膜蛋白PhoE基因以及金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因作为靶基因,建立了同时检测这3种致病菌的多重PCR方法,并对混有3种致病菌的盲肠内容物分别采用传统细菌分离培养法和PCR方法进行检测,同时对混有3种致病菌的粪便样品进行PCR检测.该方法能扩增出目的片段分别为495 bp、333 bp、279 bp.在优化条件下,多重PCR同时检测沙门菌、肺炎克雷伯菌及金黄色葡萄球菌的敏感度分别为1.23 pg、1.9 pg、1.185 ng DNA.分离培养法对沙门菌、肺炎克雷伯菌及金黄色葡萄球菌的最低检出限分别为1×102CFU、1×100CFU和1×102 CFU.混合有3种致病菌的盲肠内容物和粪便,经增菌培养后,PCR法的最低检出量均为1× 100CFU.本研究建立的多重PCR检测方法具有特异性及灵敏度高、操作简单、周期短的优点,适用于实验小鼠多种致病菌的快速检测和监控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭滨	复旦大学生命科学学院遗传与遗传工程系	10	84	4.0	9.0
2	张诗渝	复旦大学发育生物学研究所	1	1	1.0	1.0