TRPC6对TGF-β1诱导体外足细胞损伤的作用

• 作者: 古贤君 尤燕舞 林栩 汤春荣 覃幼玲 谭军华 黄海庭 黄美英 黄非凡
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 足细胞 转化生长因子-β1 凋亡 结蛋白 Nephrin Caspase9
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 340-346
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2017.05.003

摘要

目的 探讨瞬时受体电位C6(transient receptor potential cation channel 6, TRPC6)对TGF-β1干预下足细胞nephrin、desmin、caspase 9蛋白表达及细胞凋亡的影响.方法 体外培养小鼠肾足细胞分为4组:正常对照组、TGF-β1干预组、TGF-β1+PGPU6/GFP/Neo-TRPC6-mus-581组(TRPC6低表达组)和TGF-β1+PGPU6/GFP/Neo-NC组(空载体组),干预48 h后用Western blot和real-time PCR 检测nephrin、desmin、caspase 9蛋白和mRNA表达水平,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DAPI染色观察凋亡细胞核形态学变化.结果 转染48 h时足细胞表达绿色荧光蛋白较24 h时明显增强,TRPC6低表达组TRPC6蛋白水平较正常对照组明显下降(P<0.05),空载体组TRPC6蛋白表达水平无明显变化;TGF-β1干预48 h后desmin、caspase 9蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.01),nephrin蛋白和mRNA表达水平明显下降(P<0.05),敲低TRPC6表达上述变化不明显;TGF-β1干预组足细胞凋亡率为(14.0±2.1)%,TRPC6低表达组凋亡率为(10.90±0.56)%(P<0.05),空载体组细胞凋亡率无明显差异;TGF-β1干预后足细胞凋亡增多并出现典型凋亡细胞核形态学改变.结论 TGF-β1能诱导足细胞凋亡、减少nephrin表达、增加desmin和caspase 9表达,其机制可能与上调TRPC6表达密切相关,敲低TRPC6表达能逆转上述变化,对足细胞具有保护作用.