飞蝗细胞色素P450基因LmCYP6FD3的表达及其在杀虫剂解毒中的作用

• 作者: 刘娇 吴海花 张学尧 张建珍 朱文雅 马恩波
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞色素P450 飞蝗 基因表达 RNA干扰 杀虫剂
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 742-749
• 页数: 8页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2017.07.002

摘要

[目的]研究飞蝗Locusta migratoria细胞色素P450基因的分子特性和生物学功能.[方法]搜索飞蝗转录组数据库,获得细胞色素P450基因cDNA序列,采用RT-PCR技术克隆目的基因cDNA全长序列.采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术测定其在飞蝗5龄若虫不同组织(胃盲囊、前肠、中肠、后肠、体壁、精巢、卵巢、肌肉、血淋巴、脂肪体和马氏管)中及不同发育阶段(卵、1-5龄若虫及成虫)的表达水平.采用RNA干扰(RNAi)技术沉默飞蝗2龄若虫细胞色素P450基因,检测基因的沉默效率,并研究该基因干扰后,2龄若虫对杀虫剂马拉硫磷、西维因和溴氰菊酯3种杀虫剂的敏感性.[结果]克隆获得飞蝗细胞色素P450基因的cDNA全长序列(GenBank登录号:KT316378),将其命名为LmCYP6 FD3,其核苷酸序列全长为1 563 bp,编码521个氨基酸.研究发现该基因在飞蝗5龄若虫马氏管中高表达,其次是后肠和脂肪体中,在其他组织中的表达量相对较低;对LmCYP6 FD3在飞蝗不同发育阶段的表达进行检测,发现该基因在飞蝗整个发育阶段均有表达,在若虫期表达量较高.RNA干扰结合杀虫剂生物测定结果表明,LmCYP6 D3在RNA干扰24 h时的沉默效率最高;2龄若虫点滴接触西维因,RNAi处理组(dsLmCYP6 FD3注射组)与对照组(dsGFP注射组)相比,死亡率提高了32％.[结论]克隆获得飞蝗LmCYP6 FD3的cDNA全长序列,该基因在飞蝗马氏管中高表达,并可能参与西维因在飞蝗体内的解毒代谢.