翼螺旋转录因子FOXO1的DNA结合域的表达、纯化及结合特性

• 作者: 哈依努尔 李俊 陈主初 陈林 陈永恒
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 关键词: FOXO1 DNA结合域 表达纯化 凝胶迁移实验
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 字数: 4257字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2017.01.001

摘要

目的:探讨翼螺旋转录因子FOXO1的DNA结合域(FOXO1 DNA binding domain,FOXO1-DBD)的表达、纯化及与DNA的结合特性.方法:采用优化FOXO1-DNA的基因序列和低温诱导的方式实现FOXO1-DBD蛋白的可溶性表达,通过镍亲和层析及阳离子交换层析进行纯化,并经凝胶迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证FOXO1-DBD的DNA结合特性.结果:优化后的FOXO1基因在21 ℃时编码的蛋白大多以可溶性方式表达,通过两步纯化即可获得95％以上纯度的FOXO1-DBD蛋白,纯化的蛋白与含FOX家族DNA结合基序(G/ATAAACA)的DNA序列显示良好的结合特性.结论:建立了FOXO1-DBD蛋白高效表达、纯化的方法,验证了FOXO1蛋白在识别DN上的复杂性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈主初	中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室	108	726	14.0	21.0
2	李俊	中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室	71	389	11.0	17.0
3	哈依努尔	中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室	4	17	3.0	4.0
5	陈永恒	中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室	6	7	2.0	2.0