凡纳滨对虾抗菌肽crunstinA在毕赤酵母菌中的表达

• 作者: 何苹萍 彭金霞 王瑞 雷爱莹 马宁 马春霞 黎铭
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 凡纳滨对虾 抗菌肽 毕赤酵母菌 真核表达
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 1310-1316
• 页数: 7页
• 分类号: S945.46
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2017.07.30

摘要

[目的]明确凡纳滨对虾抗菌肽crunstinA(LvcrustinA)在毕赤酵母菌中的表达情况,为研发出一种基于重组蛋白crustinA的新型水产药物打下基础.[方法]采用全基因合成法(PAS)合成LvcrustinA基因,然后将LvcrustinA基因克隆至真核表达载体pYE-GAPα,所得重组质粒转化感受态细菌TOP10,以质粒提取试验盒提取的重组质粒pYE-GAPα-LvcrustinA电转至毕赤酵母菌GS115;以SDS-PAGE电泳检测和Western blotting鉴定分析融合蛋白LvcrustinA的表达情况,并通过保护试验验证融合蛋白LvcrustinA对副溶血弧菌的抵抗作用.[结果]以构建的重组质粒pYE-GAPα-LvcrustinA电转毕赤酵母菌GS115,获得的重组菌株在30℃下摇床(220 r/min)培养24 h即可获得融合蛋白LvcrustinA,且随培养时间的延长,其表达量逐渐增多.Western blotting鉴定结果显示,纯化的融合蛋白LvcrustinA能被抗His抗体识别.保护试验结果表明,融合蛋白LvcrustinA对副溶血弧菌具有良好的抵抗力.[结论]利用表达质粒pYE-GAPα和酵母菌GS115可成功重组表达获得LvcrustinA,且获得的LvcrustinA具有促进凡纳滨对虾抵抗副溶血弧菌感染的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马春霞		8	13	2.0	3.0